a、
不同濃度的板模所需達到反應平原的週期數不同。板模濃度越低,要達到反應平原的週期數越多。於實時
PCR中,一般行40週期的擴增。
Ct與log copy number之標準線性關係。由己知起始copy數目的 DNA於一系列不同濃度下進行PCR後,藉
threshold cycle(Ct)與擴增前copy數之對數成線性關係的特性,只要找出未知量DNA的Ct,則可藉外插法確定
其數量。實時定量PCR (real-time quantitative PCR)。具螢光物 “Reporter,R” 的探針與引子對分別和DNA
煉合進行PCR擴增。報告螢光被抑制物“Quencher,Q”影響使螢光能量無法釋放。只有當合成股延長到使螢
光探針位移及裂解時,螢光物與抑制物分開才能釋出螢光,間接顯示專一性擴增正在進行中。
2003-02 版本 |